Skip to content

Zmiany specyficzne dla kłębuszków ekspresji VEGF-A prowadzą do wyraźnych wrodzonych i nabytych chorób nerek czesc 4

2 miesiące ago

769 words

Analiza SDS-PAGE została przeprowadzona przy użyciu 2.l mysiego moczu. Ścieżka zawiera znaczniki masy cząsteczkowej, ścieżka 2 pokazuje mocz z VEGF-loxPa / a, Neph-Cre + /. kontrola w wieku 9 tygodni, a ścieżka 3 pokazuje mocz z 9-tygodniowego chorego VEGF-loxP + / ., Neph-Cre + /. zwierzę. Obecność dużej ilości albuminy o wartości 66,2 kDa jest identyfikowana u chorej myszy i wykazuje uszkodzenie filtru nerkowego. W przeciwieństwie do tego, niskie białka o małej masie cząsteczkowej, które normalnie występują w moczu myszy, nie są różne. (b) Wykres słupkowy pokazujący podwyższony poziom kreatyniny (ponad dziesięć razy większy niż normalnie), podwyższony poziom mocznika i obniżona hemoglobina (Hgb) w VEGF-loxP + / a, Neph-Cre + /. myszy (VEGF-pod + / y) w wieku 9 tygodni w porównaniu z VEGF-loxP + / a, Neph-Cre. /. i VEGF-loxP. / ., Neph-Cre + /. myszy (połączone w celu analizy i uznane za typ dziki). (c) Obraz całego nerek z chorego 9-tygodniowego VEGF-loxP + / ., Neph-Cre + /. myszy (+/-) w porównaniu z myszami z rodzaju dzikiego (+ / +). Dotknięta nerka jest blada i skurczona. Powiększenie: × 60. (d) kłębuszka typu dzikiego. Zwróć uwagę na otwarte pętle kapilarne (Cap). × 350. (e) kłębuszka od heterozygotycznej myszy VEGF-A. Wszystkie kłębuszki są rażąco zniekształcone morfologicznie. Zwróć uwagę na puste wakuole cytoplazmatyczne (v) obecne w podocytach. Nie widać pętli kapilarnych u patentów. Widoczne kanaliki (t) i w większości miejsc są wypełnione materiałem białkowym, zgodnym z zespołem nerczycowym. Powiększenie: × 375. W wieku 9 tygodni nerki były blade i skurczone (ryc. 2c). W świetle mikroskopowym kłębuszki wyglądały histologicznie normalnie po urodzeniu oraz w wieku 1, 3 i 6 tygodni. Jednakże, w wieku 9 tygodni, kępki kłębuszków zostały wycofane z ekspansją matrycy mezangialnej i były otoczone przez podocyty zawierające duże puste wakuole cytoplazmatyczne. Kanaliki wypełniono białkiem (Figura 2e i dane nie pokazane). Badania EM nad transmisją seryjną wykazały, że pierwsze wykrywalne uszkodzenie wystąpiło w wieku 2,5 tygodnia z obrzękiem komórek śródbłonka (śródbłonka) i depozytami szklistymi (Figura 3a), które przypominają patologiczne zmiany obserwowane w biopsjach nerkowych od pacjentów ze stanem przedrzucawkowym, powszechną chorobą ciąża (21). W tym czasie podocyty i komórki śródbłonka okazały się ultrastrukturalnie normalne, odpowiednio z dobrze uformowanymi procesami stóp i fenestracjami. W wieku 6,5 tygodnia rozszerzono GBM i nie można było już zidentyfikować fenestracji śródbłonka (ryc. 3b). W 9 tygodniu życia komórki śródbłonka były martwicze i nie zidentyfikowano żadnych procesów podocytów (fig. 3b). Figura 3 heterozygotyczny VEGF-loxP + / a, Neph-Cre + /. myszy wykazują endotelialozę i utratę fenestracji. (a) W wieku 2,5 tygodnia, kłębuszkowe kapilarne kapelusze typu dzikiego (c) są otwarte i zawierają liczne czerwone krwinki. W przeciwieństwie do tego heterozygoty VEGF-A specyficzne dla podocytów (+ / y) wykazują bezkrwiste kłębuszki, a pętle kapilarne są wypełnione spuchniętymi komórkami śródbłonka, wykazując śródbłonka, klasyczne uszkodzenie nerek stanu przedrzucawkowego. Ponadto można zaobserwować duże podśródbłonkowe złogi hialinowe (*). (b) W wieku 6,5 tygodnia bariery filtracyjne typu dzikiego (+ / +) charakteryzują się fenestrowanymi komórkami śródbłonka (en) i dobrze ukształtowanymi procesami podocytów (fp). W heterozygotach specyficznych dla podocytów (+ / y), fenestracje są tracone w wieku 6,5 tygodnia, a do 9 tygodnia życia komórki śródbłonka pojawiają się martwicowo i nie można zidentyfikować żadnych procesów podocytów. Analiza markerów molekularnych potwierdziła zanik zróżnicowanych podocytów z całkowitym brakiem WT1, nefryny i VEGF-A w większości kłębuszków myszy terminalnie chorych (Figura 4, g i h, i dane nie pokazane). Czasami można było zidentyfikować pojedynczą komórkę, która wybarwiała się pozytywnie dla tych markerów (Figura 4h). Te markery były obecne w momencie urodzenia oraz w wieku 3 i 6 tygodni (Figura 4, df i dane niepokazane). Poziom mRNA VEGF-A był konsekwentnie niższy w heterozygotycznych kłębuszkach VEGF niż w kłębuszkach kontrolnych na tym samym etapie rozwoju (Figura 4d). VSMA normalnie nie występuje w 9-tygodniowych komórkach mezangialnych, o ile nie są. Aktywowane. w urazie kłębuszkowym; w heterozygotach, sporadyczne komórki VSMA-dodatnie zidentyfikowano w kłębuszkach (Figura 4i). Figura 4 Wyznakowana digoksygenem analiza in situ kłębuszków typu dzikiego i zmutowanych. (a (c) pętla kapilarna – kłębuszki fazowe noworodków VEGF-loxPa / a, Neph-Cre + / y kontrolna mysz wykazuje ekspresję VEGF-A i WT1 w podocytach, podczas gdy VSMA ulega ekspresji w komórkach mezangialnych, które znajdują się w kłębuszku nerkowym i są wymagane do wspierania struktury naczyń włosowatych
[przypisy: wrzodziejące zapalenie jelita grubego objawy, leki na wątrobę bez recepty, maseczka z siemienia lnianego na włosy ]
[podobne: diukowie hazzardu cda, outlet szczecin godziny otwarcia, psychoterapia na czym polega ]