Skip to content

Zależna od MyD88 indukcja alergicznych odpowiedzi Th2 na antygen donosowy czesc 4

3 miesiące ago

512 words

Analiza populacji komórek nie będących CD11c + z nie strawionej tkanki płucnej metodą FACS. Ekspresja markerów komórkowych Mac1, B220, Grl, , NK, CD4 i CD8 na komórkach nie będących CD11c + jest pokazana na rozproszeniu w przód (Fsc) w porównaniu z kontrolą izotypową. Liczby wskazują procent żywych komórek dodatnich dla wskazanego markera komórkowego. W celu zbadania odpowiedzi płucnych DC na LPS in vivo, myszy z niedoborem WT i MyD88 poddano donosowemu podawaniu OVA / LPS. Pobrano komórki płucne i zaobserwowano fenotyp komórek płuc CD11c +. Ekspresja zarówno MHC klasy II, jak i CD86 na komórkach płuc CD11c + była zwiększona u myszy WT, w porównaniu z kontrolnymi PBS, w odpowiedzi na OVA / LPS (Figura 4A). Jednak myszy z niedoborem MyD88 nie zwiększyły ekspresji MHC klasy II i CD86 na CD11c + DC płucne po ekspozycji na donosowe OVA / LPS (Figura 4A). Zgodnie z wcześniejszymi badaniami, CD11c + BMDC z myszy z niedoborem WT i MyD88 dokonały inaktywacji MHC klasy II i CD86 w odpowiedzi na OVA / LPS in vitro (Figura 4B). Te wyniki sugerują, że niezdolność do indukowania odpowiedzi Th2 w nieobecności MyD88 jest częściowo spowodowana wadliwym dojrzewaniem DC płucnym. Figura 4 Dreny płucne nie są aktywowane przez LPS pod nieobecność MyD88 in vivo. (A) Analiza MHC klasy II i CD86 FACS, po 48 godzinach, komórek CD11c + płuc z myszy z niedoborem WT i MyD88 uczulonych na OVA / LPS lub PBS donosowo. (B) Analiza MHC klasy II i CD86 FACS CDCDc + BMDC generowanych przez myszy z niedoborem WT i MyD88, pulsowanych OVA / LPS przez noc lub pozostawionych bez leczenia (bez Tx). Jednym z możliwych wyjaśnień obserwowanej rozbieżności w odpowiedzi między DC płucnymi a BMDC są różnice między trybami stymulacji in vivo i in vitro. Zatem, aby bardziej bezpośrednio porównać wpływ LPS na DC płucne w porównaniu z BMDC, zarówno komórki płuc CD11c +, jak i BMDC z myszy z niedoborem WT i MyD88 stymulowano in vitro różnymi dawkami LPS i oznaczano ekspresję CD86. Nasze odkrycia wskazują, że DC płucne WT mniej reagowały na LPS niż BMDC in vitro (Figura 5A). Ponadto, zgodnie z naszymi badaniami in vivo i w przeciwieństwie do wyników z BMDC, zwiększona ekspresja CD86 na płucnych DC była zależna od MyD88 (Figura 5, B i C). Podsumowując, dane te wskazują, że płucna aktywacja DC jest zależna od MyD88. Fig. 5 DCs z niedoborem płuc wykazuje defektywną aktywację w odpowiedzi na LPS in vitro. (A) Zmiana ekspresji CD86 w ciągu 24 godzin na komórkach płuc CDIc + myszy WT i CDCDc + BMDC wytworzonych od myszy WT reagujących na stymulację różnymi dawkami LPS in vitro. Wysokości prętów stanowią średnią 3 niezależnych eksperymentów. (B) Zmiana ekspresji CD86 w ciągu 24 godzin na CD11c + BMDC wygenerowanych z myszy z niedoborem WT i MyD88. (C) Zmiana ekspresji CD86 w 24 godzinie na komórkach płuc CD11c + myszy WT i myszy pozbawionych MyD88. * P <0,05, WT w porównaniu z komórkami płuc z niedoborem MyD88 i komórkami płuc WT w porównaniu z BMDC WT. Ekspresja IFN w komórkach płucnych typu I jest wadliwa w odpowiedzi na LPS. Zaangażowanie LPS w szlaku zależnym od MyD88 charakteryzuje się indukcją zapalnych cytokin, takich jak TNF-a. Zależność LPS od szlaku niezależnego od MyD88 charakteryzuje się centralnie przez indukcję IFN-y. Ogólnie rzecz biorąc, receptory TLR można podzielić na podgrupy na podstawie ich zdolności do indukowania IFN-y. (36). W szczególności wykazano, że TLR4 i TLR9 mają zdolność indukowania IFN-y. produkcja. Te TLR można dalej podzielić w oparciu o cząsteczkę adaptora odpowiedzialną za taki IFN-y. produkcja. IFN-. indukcja przez włączenie TLP9 w CpG okazała się zależna od MyD88. Natomiast IFN-y indukcja za pomocą LPS TLR4 wykazała, że jest niezależna od MyD88, w której pośredniczy ostatnio zidentyfikowana przejściówka zawierająca cząsteczkę TIR domeny a, indukującą IFN-y. (TRIF) (23, 24). W związku z tym IFN-y ekspresja była stosowana jako miara aktywacji ścieżki niezależnej od MyD88 po włączeniu TLR4 przez LPS. Zaangażowanie LPS w szlak niezależny od TLR4 / MyD88 . było wcześniej uważane za wystarczające do regulacji w górę cząsteczek kostymulujących na powierzchni APC. Ostatnie badania sugerują, że taka upregulacja zależy od zaangażowania TRP przez TRP i późniejszej aktywacji IFN-y w dół (37). Biorąc pod uwagę, że nasze badania demonstrują wadliwą regulację w górę cząsteczek kostymulujących przez płucne APC w przypadku braku MyD88 w odpowiedzi na LPS, próbowaliśmy określić, poprzez ocenę IFN-y indukcja, niezależnie od tego, czy zależność odpowiedzi płucnych Th2 od MyD88 była konsekwencją wadliwego włączenia szlaku niezależnego od MyD88 przez LPS w płucach [podobne: crt d, badanie elektrofizjologiczne serca, badanie elektrofizjologiczne ] [podobne: outlet szczecin godziny otwarcia, psychoterapia na czym polega, polskie towarzystwo ginekologiczne ]