Skip to content

Zależna od MyD88 indukcja alergicznych odpowiedzi Th2 na antygen donosowy cd

3 miesiące ago

141 words

Dwa tygodnie później wszystkie myszy poddano prowokacji donosową OVA. Jak pokazano na Figurze 2A, myszy z niedoborem MyD88 miały eozynofilowe zapalenie w płucu podobne do tego u myszy WT po uczuleniu ip z OVA / ałunem i prowokacją donosową OVA. Jest to zgodne z wcześniejszymi badaniami wykazującymi niezależność MyD88 od odpowiedzi Th2 indukowanych przy użyciu sensybilizacji OVA / alum (13). W przypadku braku MyD88 może wystąpić zapalenie płuc wywołane TNT. (A) Komórki zapalne BAL myszy pozbawionych WT i MyD88 uczulonych OVA / LPS donosowo lub OVA / ałunu ip. Eksponowane myszy poddano następnie prowokacji 2 tygodnie później wdychanym OVA. Całkowita wysokość słupka przedstawia całkowitą liczbę komórek BAL w dniu 21 po prowokacji. Paski błędów są oparte na całkowitej liczbie komórek. Ułożone słupki reprezentują liczbę różnicową komórek. n = 4. * P <0,05, WT vs. myszy z niedoborem MyD88 zagruntowane OVA / LPS. Pokazano jeden reprezentatywny eksperyment 3. (B) Komórki zapalne BAL myszy z niedoborem WT i MyD88 uczulone donosowo z OVA / LPS lub OVA / TNF-a. Odsłonięte myszy poddano następnie prowokacji 2 tygodnie później za pomocą wziewnego OVA. Całkowita wysokość słupka przedstawia całkowitą liczbę komórek BAL w dniu 21 po prowokacji. Paski błędów są oparte na całkowitej liczbie komórek. Ułożone słupki reprezentują liczbę różnicową komórek. n = 4. * P <0,05, WT vs. myszy z niedoborem MyD88 zagruntowane OVA / LPS. Pokazano jeden reprezentatywny eksperyment 3. Podobne wyniki zaobserwowano, gdy myszy eksponowano na donosowe TNF-a. z antygenem OVA podczas uczulenia. TNF-. jest główną prozapalną cytokiną wydzielaną w odpowiedzi na zaangażowanie TLR, która jest zdolna do indukowania dojrzewania DC i migracji (27. 30). Podczas gdy TNF-a stwierdzono, że wydzielanie jest zależne od MyD88, TNF-a sygnalizacja może wystąpić niezależnie od receptorów TLR i MyD88 (19, 20, 24). Zgodnie z tym, wcześniej stwierdziliśmy, że TNF-a może odtwarzać odpowiedzi Th2 u myszy TLR4d (17). Dlatego uzasadniliśmy, że TNF-a powinien również być w stanie przywrócić odpowiedzi Th2 na donosową OVA u myszy z niedoborem MyD88. Myszy z niedoborem WT i MyD88 uczulano na OVA / TNF-a. donosowo, a następnie prowokowano 2 tygodnie później donosową OVA pod nieobecność TNF-a. Potencjalne odpowiedzi Th2 generowano u myszy z niedoborem MyD88, gdy TNF-a został włączony podczas fazy wstępnej, indukując wytwarzanie silnego nacieku eozynofilowego w płucu (Figura 2B). Podsumowując, te dane wskazują, że utrata odpowiedzi Th2 na niskodawkową LPS u myszy z niedoborem MyD88 wynika raczej z braku zalegania niż z wewnętrznej wady zdolności do rekrutacji komórek Th2 do płuc. Aktywacja DC płucnych wymaga MyD88. Ekspresja powierzchni DC cząsteczek kostymulujących MHC klasy II i B7 jest niezbędna do nieskutecznej aktywacji limfocytów T, a zatem do indukcji odpowiedzi Th2 (30). Wcześniejsze badania wykazały, że w odpowiedzi na LPS, BMDC z myszy z niedoborem MyD88 zachowują zdolność do regulowania w górę obu tych cząsteczek na poziomach podobnych do BMT WT (21). Jednakże, biorąc pod uwagę utratę odpowiedzi Th2 na donosową OVA u myszy z niedoborem MyD88, staraliśmy się określić zdolność płucnych DC do regulowania w górę ekspresji tych cząsteczek w odpowiedzi na LPS. Wcześniej wykazaliśmy preferencyjny wychwyt i prezentację podawanego donosowo antygenu do specyficznych antygenowo komórek T za pomocą komórek płucnych wyrażających marker DC CD11c (31). Aby zmaksymalizować wydajność komórek CD11c + i zminimalizować potencjalną aktywację in vitro, wyizolowaliśmy komórki płuc przy braku trawienia kolagenazą. Zwierzęta wykorzystywane do naszych eksperymentów były również trzymane w czystych pomieszczeniach, aby zminimalizować potencjalne wywoływanie aktywacji płuc przez mikroorganizmy środowiskowe. Izolacja komórek płucnych od tych zwierząt w nieobecności kolagenazy prowadzi do większego odsetka komórek CD11c + w porównaniu z izolacją z trawieniem kolagenazą, chociaż całkowita liczba otrzymanych komórek CD11c + jest porównywalna (Figura 3A). Nasze dane zgadzają się z innymi. w tym bardzo mało komórek zapalnych obserwowano w spoczynkowym płucu (25, 32. 35). Komórki nie-CD11c +, które otrzymaliśmy tą metodą, obejmowały populację komórek Mac1 +, jak opisano wcześniej (31) (Figura 3B); kilka limfocytów B, granulocytów, limfocytów T, komórek NK i. obserwowano komórki (Figura 3B). Figura 3. Fenotyp komórek płucnych przy braku trawienia kolagenazą. (A) Niestymulowane komórki płucne zebrane od myszy WT zi bez trawienia kolagenazą i analizowane przez FACS. Procentowa wydajność i całkowita liczba komórek CD11c + uzyskanych z spoczynkowego płuca przez trawienie kolagenazą (D) są pokazane w porównaniu z tymi z nie strawionej tkanki (N) [więcej w: nakładanie żelu na paznokcie, kardiolog blog, crt p ] [więcej w: kalendarzyk miesiączkowy ob, przeciwwskazania do mikrodermabrazji, diukowie hazzardu cda ]