Skip to content

Zależna od MyD88 indukcja alergicznych odpowiedzi Th2 na antygen donosowy ad

1 miesiąc ago

518 words

Takie zależne od MyD88 dojrzewanie DC w płucach wynika z niezdolności LPS do sprzęgania szlaku niezależnego od MyD88 w środowisku płucnym. To zależne od MyD88 dojrzewanie kontrastuje z dojrzewaniem niezależnym od MyD88 obserwowanym w BMDC. Ponadto aktywowane BMDC mogą odtwarzać odpowiedzi Th2 w układzie płucnym pacjentów z niedoborem MyD88. Podsumowując, wykorzystanie wrodzonych składników TLR4 / MyD88 w indukcji odpowiedzi Th2 określa się w sposób specyficzny dla miejsca. Wyniki Odpowiedzi Th2 na donosowy antygen białkowy są zależne od MyD88. Wcześniej opracowaliśmy mysi model astmy oparty na uczuleniu na wziewną OVA pod nieobecność tradycyjnie stosowanego adiuwantu wodorotlenku glinu (25). Odpowiedzi Th2 generowane w tym modelu charakteryzują się zapaleniem dróg oddechowych, eozynofilią, nadmiernym wydzielaniem śluzu, wytwarzaniem IgE i wytwarzaniem głównie cytokin Th2. Stwierdziliśmy, że generowanie tych odpowiedzi Th2 wymagało niskich dawek LPS działających w sposób zależny od TLR4 (17). Jednak ostatnie badania przeprowadzone przez innych wykazały, że przy braku MyD88 odpowiedzi Th2 są nienaruszone lub zwiększone, co sugeruje, że komórki Th2 są aktywowane w sposób niezależny od MyD88 (12-15). Ponieważ LPS sygnalizuje zarówno szlaki zależne od MyD88, jak i niezależne od MyD88, staraliśmy się określić role tych szlaków w uczuleniu myszy Th2 na antygen donosowy. WT, z defektem TLR4 (C.C3H-TLR4LPS-d [TLR4d]) lub myszy z niedoborem MyD88 uczulano PBS lub OVA z niskodawkową LPS (OVA / LPS) donosowo. Dwa tygodnie później wszystkie grupy myszy poddano prowokacji donosową OVA. Jak pokazano na Figurze 1A, myszy WT wystawione na donosowe OVA / LPS w porównaniu z PBS wykazywały znaczący wzrost całkowitej liczby komórek w płucach oskrzelowo-pęcherzykowych (BAL) z charakterystycznym naciekiem eozynofilowym, co wskazuje na odpowiedź Th2. Co więcej, zarówno specyficzne dla OVA IgG1, jak i IgE były znacząco indukowane u tych myszy (Figura 1B). Jak wcześniej wspomniano, odpowiedzi te były znacząco zmniejszone u myszy TLR4d, co demonstruje zależną od LPS zależność TLR4 od tej odpowiedzi za pośrednictwem Th2. Jednakże, nieoczekiwanie, myszy z niedoborem MyD88 wykazywały również zmniejszoną odpowiedź na OVA / LPS, z zniesieniem wytwarzania IgE i znaczącym zmniejszeniem zapalenia dróg oddechowych i eozynofilii (Figura 1, A i B). Wytwarzanie cytokin Th2 IL-4, IL-5 i IL-13 w drenującym węźle limfatycznym również było znacząco zmniejszone zarówno u myszy z niedoborem TLR4 i MyD88 (Figura 1C). Dane te wskazują, że odpowiedź na sensybilizację donosową za pomocą OVA / LPS jest nie tylko zależna od TLR4, ale w przeciwieństwie do uprzednio przebadanych antygenów indukujących Th2, jest również zależna od MyD88. Odpowiedzi na Fig. 1Th2 na donosowy antygen białkowy są zależne od MyD88. (A) komórki zapalne BAL myszy WT, myszy z niedoborem MyD88 lub TLR4d uczulone donosowo z myszami OVA / LPS i WT uczulonymi PBS. Odsłonięte myszy poddano następnie prowokacji 2 tygodnie później za pomocą wziewnego OVA. Całkowita wysokość słupka przedstawia całkowitą liczbę komórek BAL, a słupki błędu są oparte na całkowitej liczbie komórek. Ułożone słupki reprezentują liczbę różnicową komórek. n = 4. * P <0,05, całkowita liczba komórek BAL z WT vs. niedobór MyD88 i WT vs. TLR4d. Pokazano jeden reprezentatywny eksperyment 4. (B) Odpowiedzi przeciwciał specyficzne względem OVA w surowicy za pomocą ELISA po ekspozycji na OVA u myszy WT, myszy z niedoborem MyD88 i TLR4d uczulonych, jak opisano w A. P <0,05, WT w porównaniu z MyD88-defektywnym i WT vs. TLR4d, w IgE i Odpowiedzi IgG1. (C) Wytwarzanie cytokiny z węzłów chłonnych płuca płuca po prowokacji OVA u myszy WT, z niedoborem MyD88 i TLR4d uczulonych, jak opisano w A. Zapalenie płuc wywołane przez Th2 może wystąpić w nieobecności MyD88. Utrata odpowiedzi Th2 na donosowe białko OVA przy niskich dawkach LPS u myszy z niedoborem MyD88, opisanych powyżej, może być spowodowana defektem uczulenia, defektem w rekrutacji zapalnych komórek Th2 do płuc lub obu. Aby sprawdzić, czy MyD88 ma wpływ na rekrutację komórek zapalnych do płuc, wykorzystaliśmy 2 niezależne od TLR / MyD88 . protokoły uczulania i przeanalizowaliśmy rolę MyD88 w fazie prowokacji odpowiedzi. Pierwszy protokół pociągnął za sobą powszechnie stosowane uczulenie ip OVA w obecności ałunu (26). Alum jest adiuwantem Th2 pozbawionym składników mikrobiologicznych. Zatem jego działanie uważa się za niezależne od sygnalizacji TLR. Wcześniej wykazaliśmy indukcję silnych odpowiedzi Th2 na OVA w ałunie u myszy TLR4d, co wskazuje, że LPS nie była wymagana dla tych odpowiedzi (17). Myszy z niedoborem WT i MyD88 uczulano za pomocą OVA / ałunu ip [podobne: wiarygodny test internetu, psychoterapia na czym polega, kalendarzyk miesiączkowy ob ] [więcej w: kardiolog blog, badania elektrofizjologiczne, crt p ]