Skip to content

Zależna od MyD88 indukcja alergicznych odpowiedzi Th2 na antygen donosowy ad 5

3 miesiące ago

722 words

Zatem myszy WT eksponowano na PBS, LPS lub CpG i na ekspresję TNF-a. i IFN-y w płucach został określony. Podczas gdy ekspozycja na LPS i CpG doprowadziła do indukcji TNF-a (Figura 6A), LPS nie był w stanie indukować IFN-y ekspresja w płucu (Figura 6B). Natomiast indukcja IFN-y był nienaruszony w odpowiedzi na ligand TLR9 CpG. Badania te sugerują wadliwe sprzężenie szlaku niezależnego od MyD88 przez LPS w środowisku płucnym. Rysunek 6IFN-. nie jest indukowany w odpowiedzi na ekspozycję LPS w płucach. Myszy WT eksponowano na PBS, LPS i CpG. Komórki płuc zebrano 18 godzin po ekspozycji i zlizowano, a RNA ekstrahowano. Pięć mikrogramów każdej próbki RNA analizowano za pomocą testu ochrony przed RNazą przy użyciu sondy mCK-3b RiboQuant. Zwiń indukcję (A) TNF-a i (B) IFN-y pokazano w odniesieniu do PBS. Dojrzałe BMDC mogą odtwarzać odpowiedzi Th2 u myszy z niedoborem MyD88. Nasze dane wskazują, że brak wywoływania odpowiedzi Th2 u myszy z niedoborem MyD88 może być częściowo spowodowany wadliwym dojrzewaniem DC. W celu dalszego zbadania roli aktywacji DC w indukcji płucnych odpowiedzi Th2, badaliśmy, czy transfer aktywowanych DC odtwarzałby odpowiedzi Th2 u myszy z niedoborem MyD88. BMDC wytworzone od myszy WT hodowano z lub bez OVA / LPS in vitro i przenoszono donosowo do biorców z niedoborem WT lub MyD88. Jak widać na Figurze 2B, te BMDC wyrażają zwiększone poziomy MHC II i CD86 w odpowiedzi na OVA / LPS. Przeniesienie BMDC aktywowanych OVA / LPS. Do myszy WT indukowało silną odpowiedź eozynofilową Th2 (Figura 7). Co więcej, indukowano porównywalną odpowiedź, gdy aktywowane BMDC przeniesiono na myszy z niedoborem MyD88. Przeniesienie BMD WT nie eksponowanych na OVA na biorców WT nie wywoływało reakcji zapalnych Th2. Te dane sugerują, że myszy z niedoborem MyD88 eksponowane na donosowy antygen mają zdolność do generowania odpowiedzi Th2 w obecności aktywowanych DC. Figura 7 Umiarkowane BMDC mogą odtwarzać odpowiedzi Th2 u myszy z niedoborem MyD88. Komórki zapalne BAL myszy z niedoborem WT i MyD88, którym podawano pulsowo BMDC pulsowe OVA / LPS . i prowokowano donosowo OVA po 2 tygodniach. Całkowita wysokość słupka przedstawia całkowitą liczbę komórek BAL w dniu 21. Pręty błędu są oparte na całkowitej liczbie komórek. Ułożone słupki reprezentują liczbę różnicową komórek. n = 4. W, nieulegające BMT WT WT do odbiorcy WT; WT OVA, ODC / LPS . pulsowe BMDC WT do biorcy WT; KO OVA, OVA / LPS . pulsowe BMDC WT do biorcy z niedoborem MyD88. P = 0,82, WT OVA vs. KO OVA. Pokazano jeden reprezentatywny eksperyment 3. Odpowiedzi Th1 indukowane przez donosową OVA z podwyższoną dawką LPS są również zależne od MyD88. Kilka badań wykazało, że odpowiedzi Th1 indukowane przez immunizację silnymi czynnikami indukującymi Th1, takimi jak Toxoplasma gondii, były całkowicie zależne od MyD88 (15). W przypadku braku MyD88 te indukujące Th1 wywołują odpowiedzi Th2. Dane te sugerują, że silne immunogeny mogą wywoływać specyficzną odpowiedź Th2 przy braku MyD88. Wcześniej obserwowaliśmy, że różnicowanie odpowiedzi Th2 w stosunku do Th1 zależy od dawki LPS, przy czym odpowiedzi Th2 są indukowane OVA przy niskich dawkach LPS, a odpowiedzi Th1 obserwowane przy OVA przy wysokich dawkach LPS. Dlatego też, w celu ustalenia, czy domyślne odpowiedzi Th2 w płucach można indukować OVA przy wysokich dawkach LPS pod nieobecność MyD88, zbadaliśmy wpływ zwiększonej dawki LPS na indukcję specyficznych dla OVA odpowiedzi u myszy z niedoborem MyD88. Zgodnie z naszymi wcześniejszymi badaniami, myszy WT wykazały charakterystyczną odpowiedź Th1 na OVA, gdy LPS o dużej dawce była obecna podczas primingu, z brakiem eozynofilowości, ale silną neutrofilową odpowiedzią zapalną (Figura 8). Jednakże odpowiedź zapalna płuc indukowana przez OVA przy wysokich dawkach LPS była znacząco zmniejszona u myszy z niedoborem MyD88. Zatem zarówno odpowiedzi Th1, jak i Th2 wywołane przez donosowy antygen są zależne od MyD88. Figura 8 Odpowiedź LPS w dużej dawce jest zależna od MyD88. Komórki zapalne BAL myszy z niedoborem WT i MyD88 uczulały donosowo OVA / dużą dawką LPS. Odsłonięte myszy poddano prowokacji 2 tygodnie później za pomocą wziewnego OVA. Całkowita wysokość słupka przedstawia całkowitą liczbę komórek BAL w dniu 21 po prowokacji. Paski błędów są oparte na całkowitej liczbie komórek. Ułożone słupki reprezentują liczbę różnicową komórek. * P <0,05, OVA / duże dawki myszy z niedoborem MyD88 z niedoborem MyP88 z LPS .. Pokazano jeden reprezentatywny eksperyment 3. Odpowiedzi Th2 na antygen białek ip są niezależne od TLR4 i MyD88. Badania demonstrujące domyślne odpowiedzi Th2 pod nieobecność MyD88 wykorzystywały różne drogi uczulenia, w tym sc [więcej w: maseczka z siemienia lnianego na włosy, ciasta bezglutenowe przepisy, crt d ] [hasła pokrewne: nakładanie żelu na paznokcie, ciasta bezglutenowe przepisy, peeling kawitacyjny przeciwwskazania ]