Skip to content

Ukierunkowana ekspresja dominującego negatywnego EGF-R w nerkach zmniejsza uszkodzenia kanalikowo-śródmiąższowe po uszkodzeniu nerek

2 miesiące ago

725 words

Rola EGF w ewolucji uszkodzeń nerek po urazie nadal budzi kontrowersje. Aby określić, czy ekspresja EGF jest korzystna lub szkodliwa, wygenerowaliśmy transgeniczne myszy eksprymujące C35H-skrócony EGF-R pod kontrolą specyficznego dla nerki promotora transpeptydazy typu (3-glutamylu. Zgodnie z oczekiwaniem, transgen był eksprymowany wyłącznie na błonie podstawno-bocznej proksymalnych komórek rurkowych. W warunkach podstawowych myszy transgeniczne wykazywały prawidłową morfologię i funkcję nerek. Infuzja EGF do transgenicznych zwierząt ujawniła, że zmutowany receptor zachowywał się w sposób dominujący-ujemny i zapobiegał autofosforylacji EGF-R z EGF-R. Następnie oceniliśmy wpływ ekspresji transgenu na rozwój zmian nerek w dwóch modelach uszkodzenia nerek. Po 75% zmniejszeniu masy nerek, rozszerzanie cewnika było mniej ciężkie u myszy transgenicznych niż u zwierząt dzikich. Po przedłużonym niedokrwieniu nerek atrofię cewkową i śródmiąższowe zwłóknienie zmniejszono u myszy transgenicznych w porównaniu z myszami typu dzikiego. Korzystne działanie transgenu obejmowało zmniejszenie proliferacji komórek cewkowych, śródmiąższową akumulację kolagenu i infiltrację komórek jednojądrzastych. Podsumowując, funkcjonalna inaktywacja EGF-R w nerkowych komórkach proksymalnych kanalików zmniejszyła uszkodzenia śródbłonka po urazie nerek. Dane te sugerują, że blokowanie szlaku EGF może być strategią terapeutyczną w celu zmniejszenia postępu przewlekłej niewydolności nerek. Wprowadzenie Uważa się, że EGF-R i jego ligandy odgrywają kluczową rolę w rozwoju i patologii nerek (1, 2). EGF-R wiąże się i jest aktywowany przez rodzinę czynników wzrostu, obejmującą sam EGF, TGF-a, wiążący heparynę czynnik wzrostu EGF (HB-EGF), amfiregulinę, epiregulinę i betacelulinę (3). Niektóre z tych czynników są wydzielane przez komórki kanalików nerkowych (4), a EGF-R jest obficie wyrażany wzdłuż nefronu (5), co sugeruje, że szlak EGF działa jako układ autokrynny / parakrynny w nerce. In vitro, dodanie ligandów EGF-R do komórek nerkowych sprzyja kilku reakcjom, w tym proliferacji komórek (6, 7), migracji komórek (8, 9), wytwarzaniu kolagenu (10) i tubulogenezie (11). In vivo, istnieje coraz więcej dowodów na rolę szlaku EGF-R w kilku patologicznych stanach nerek charakteryzujących się intensywną proliferacją komórek, takich jak ostra martwica cewek, redukcja nefronów, policystyczna choroba nerek lub gruczolakorak (1, 2). Rzeczywiście, wykazano, że: (a) w fazie regeneracji po niedokrwiennym lub toksycznym uszkodzeniu nerek infuzja EGF poprawiała powrót do zdrowia po ostrej martwicy kanalików (12, 13); (b) immunowoliowy EGF zwiększył się w nerce od dnia 7 do kilku miesięcy po zmniejszeniu liczby nefronów (14. 18); (c) duże ilości EGF, związane ze zwiększoną aktywnością i apoplacją miej- scową EGF-R, wykryto w komórkach nabłonka torbielowatego u ludzi i kilku mysich modeli autosomalnej recesywnej policystycznej choroby nerek (19, 20); (d) zarówno ligandy (EGF, TGF-a), jak i sam EGF-R ulegały nadmiernej ekspresji w ludzkim raku nerkowokomórkowym, a ich poziomy korelowały z szybkością ewolucji nowotworu (21). Ponadto, w trzech różnych modelach myszy transgenicznych, wyrażających odpowiednio geny kodujące TGF-a (22), dla c-erb-B2 (23), integralnego białka błonowego podobnego do EGF-R, lub dla T24-ras (24), białka uczestniczącego w transdukcji EGF-R, aktywacji szlaku EGF-R spowodowało rozrost rurkowy i rozwój torbieli nerek. Z drugiej strony eksperymentalne podejścia mające na celu blokowanie sygnalizacji EGF-R wydają się łagodzić rozwój chorób nerek. Richard i wsp. (25) zastosowali podejście genetyczne (przez myszy hodowlane, które noszą odpowiednio mutację torbielowatą orpk i mutację EGF-R falowato-2), aby wykazać, że zmniejszająca się aktywacja EGF-R zmniejszyła gromadzenie się tworzenia torbieli cystowej u myszy. W naszym laboratorium wykazaliśmy, że umiarkowane ograniczenie zawartości sodu w diecie, które zmniejszyło progresję uszkodzeń jamisto-śródmiąższowych po redukcji nefronów, zmniejszyło regulację dodatnią kaskady EGF-AP1 i przerostu rurkowego w nerce pozostałej w subtelnie nefrektomizowanych szczurach (18) . Wreszcie, wstrzyknięcie mysio-ludzkiego chimerycznego przeciwciała anty-EGF-R hamowało wzrost ludzkich heteroprzeszczepów raka nerkowokomórkowego u myszy nagich (26). Łącznie wyniki te silnie sugerują, że EGF-R jest główną determinantą rozwoju zmian nerek, prawdopodobnie przez zwiększenie proliferacji komórek rdzenia. Podejścia genetyczne mające na celu przedstawienie bezpośrednich dowodów na rolę aktywacji EGF-R w patologii nerek napotykają dwie główne trudności: myszy pozbawione EGF-R nie są zdolne do życia po urodzeniu (27-29) i inaktywacja jednego z licznych EGF-R. s ligandy nie mogą być informacyjne ze względu na znaczną redundancję ligandów, jak sugerują badania inaktywacji TGF-a (30)
[hasła pokrewne: nadpobudliwość psychoruchowa u dzieci, badanie elektrofizjologiczne serca, kalendarzyk miesiączkowy ob ]
[więcej w: jak radzić sobie ze stresem w szkole, nadpobudliwość psychoruchowa u dzieci, wrzodziejące zapalenie jelita grubego objawy ]