Skip to content

Transkrypcyjny czynnik pośredniczący 1 jest supresorem guza u myszy i u ludzi przewlekłej białaczki mielomonocytowej ad 6

1 miesiąc ago

688 words

Ostatnie wyniki wskazują, że delecja genu wpływa również na wydłużenie transkrypcyjne genów krwi, takich jak SCL / TAL1, przez antagonizowanie Pol II wstrzymywania (15). Zatem TIF1. może wpływać na los komórek i zaangażowanie linii poprzez regulację transkrypcji, wydłużanie i degradację białek. Te efekty mogą wyjaśniać spadek ekspresji genu Csf1r obserwowany w Lin. i całkowita komórka szpiku kostnego Tif1g. /. myszy, które korelują ze zmienionym różnicowaniem monocytów w makrofagi. Ekspresja genu TIF1G jest prawie niewykrywalna w posortowanych komórkach białaczkowych około 35% pacjentów z CMML, co, jak w modelu myszy, koreluje ze zmniejszoną ekspresją genu CSF1R. W tej chorobie najczęściej zidentyfikowane mutacje somatyczne obejmują TET2 (35), RUNX1 (36, 37) i ASXL1 (38); Mutacje RAS i CBL mogą być rzadsze i wzajemnie się wykluczają (36, 39); podczas gdy mutacje w kilku innych genach kodujących regulatory epigenetyczne lub cząsteczki sygnałowe (UTX, EZH2, IDH1, IDH2) zostały zidentyfikowane z małą częstotliwością (40. 47). W tych zdarzeniach somatycznych trudno jest odróżnić te, które kierują patogenezą choroby od tych nabytych w wyniku ewolucji klonalnej. Obojętna pod względem kopii disominia jednoosobowa, która jest często obserwowana w komórkach CMML, może wpływać na region chromosomu 1p zawierający gen TIF1G (48), ale nie udało się wykryć żadnej mutacji w sekwencji kodującej genu, która mogłaby wyjaśnić jego zmniejszoną ekspresję u pacjenta. komórki. TIF1G w dół koreluje z hipermetylacją wysp CpG i specyficznym wzorem modyfikacji histonów na promotorze genu w próbkach CMML (26, 49). Związek między mutacjami w genach epigenetycznych, takich jak TET2, ASXL1, EZH2, UTX, IDH1 i IDH2 oraz regulacją w dół TIF1G, musi zostać zbadany (50. 53). TIF1. regulacja w dół mogłaby również współpracować ze zmutowanymi cząsteczkami sygnałowymi, takimi jak K-Ras, jak ostatnio wykazano w mysim modelu raka trzustki (54). Epigenetyczne leki, w tym inhibitory metylotransferazy DNA, inhibitory deacetylazy histonowej i ich połączenie są obecnie testowane jako podejścia terapeutyczne w CMML (55). Co ciekawe, ekspresja TIF1. został przywrócony w monocytach pacjentów, którzy zareagowali na środek demetylujący decytabinę, co może wskazywać albo na działanie demetylujące leczenia na promotorze genu, albo na selekcję komórek, w których gen nie był represjonowany. Jakiekolwiek są objaśnienia, zmiany w TIF1. ekspresja może być biomarkerem odpowiedzi na czynniki demetylujące w CMML (56). Wspólnie, nasze wyniki sugerują, że TIF1G jest epigenetycznie regulowanym genem supresorowym guza w komórkach krwiotwórczych. Zmniejszona ekspresja tego genu sprzyja proliferacji MPP i prowadzi do zależnej od wieku ekspansji populacji monocytów. Zmiany w ekspresji TIF1G można testować jako biomarker odpowiedzi na czynniki demetylujące i inne modyfikatory struktury chromatyny, takie jak inhibitory HDAC (57), które są obecnie opracowywane do leczenia tej choroby. Metody Myszy. Myszy trzymano w środowisku kontrolowanym temperaturą w cyklu 12-godzinnego światła / 12-godzinnego ciemnego z wolnym dostępem do wody i standardowej karmy dla gryzoni; wszystkie zastosowane myszy utrzymywano w warunkach wolnych od patogenu zgodnie z protokołami badań na zwierzętach, które zostały zweryfikowane i zatwierdzone przez Komitet Etyczny ds. Eksperymentów Zwierząt Uniwersytetu w Burgundii. Myszy cFES-Cre zostały dostarczone przez PP Pandolfi (Beth Israel Deaconess Medical Center, Harvard Medical School, Boston, Massachusetts, USA). W przypadku genotypowania genomowy DNA przygotowywano z krwi, szpiku kostnego lub biopsji ogona za pomocą zestawu Gentra Puregene Kit (QIAGEN). Zwalczone (531 bp), usunięte (360 bp) i allele Tif1g typu dzikiego (498 bp) zidentyfikowano za pomocą PCR ze starterami AFI 124 (5a-AGCTCTGGAACGTCGGTC-3a), AFI 125 (5a-GGTAAGTCAGCAAGAGCTCA-3. ) i AFM 257 (5a-GGTAGTACTTGTATGGAGGT-3.). W przypadku genomowego Q-PCR, specyficzną sekwencję umiejscowioną między eksonami 3 i 4 amplifikowano na termocyklerze 7500 FAST (Applied Biosystems) z zastosowaniem protokołu wykrywania SYBR Green, jak nakreślono przez producenta (Applied Biosystems). Specyficzne dla myszy startery do przodu i do tyłu były: Moz, 5. -GAGGACCCAGGTTCAATTCTTAG-3. i 5a-GAAGAAGCTGTCAGATCCTCTAGAACT-3y, stosowany jako kontrola standaryzacyjna, i Tiflg, 5a-GTGCCGCAGTGCCTATTT-3. i 5a-AATGCAGAGAGAGCCAGTTCCT-3 .. Przeszczep szpiku kostnego. Aby wytworzyć odtworzone myszy szpiku kostnego, wstrzyknęliśmy w sumie 2 x 106 komórek szpiku kostnego od kontroli lub Tif1g. /. dawców myszy do zatoki oczodołowej retro letalnej napromieniowanej biorcy (11 Gy) myszy BALB / c
[podobne: psychoterapia na czym polega, nadpobudliwość psychoruchowa u dzieci, kalendarzyk miesiączkowy ob ]
[patrz też: badanie elektrofizjologiczne serca, kardiolog blog, badania elektrofizjologiczne ]