Skip to content

Tlx działa jako przełącznik proangiogenny, regulując pozakomórkowy skład matryc fibronektyny w astrocytach siatkówki ad 5

3 miesiące ago

787 words

Aktywność mitotyczna w astrocytach siatkówki była najbardziej widoczna na wiodącej krawędzi rozwijającej się sieci. W siatkówkach P5 liczba astrocytów BrdU-dodatnich w tym regionie zmniejszyła się do 73,4%. 19,4% (średnia . SD, P = 0,014) w Tlx. /. myszy w porównaniu z Tlx + /. myszy. Ponieważ proliferacja astrocytów była tylko nieznacznie zmniejszona, upośledzenie ruchliwości i / lub adhezji Tlx. /. astrocyty są prawdopodobnie głównymi czynnikami leżącymi u podstaw obserwowanej deformacji sieci astrocytów w Tlx. /. Siatkówka oka. Figura 5 Defekty morfogenetyczne w tworzeniu sieci i nieudane działania proangiogenne w astrocytach siatkówki myszy Tlx KO. (A) Immunobarwione dla PDGFR. u myszy z mutacją Tlx. W Tlx. /. myszy, sieci astrocytów są słabo rozwinięte i morfogenetycznie zdezorganizowane, z mniejszą liczbą rozgałęzień. (B) Podwójne oznakowanie dla BrdU (czerwone) i PDGFR. (zielony) migrujących astrocytów w siatkówce P5. (C i D) Podwójne barwienie immunologiczne dla GFAP (czerwony) i PECAM-1 (zielony) w siatkówce P5. GFAP ulega silnej ekspresji we wszystkich astrocytach siatkówki Tlx. /. myszy pomimo całkowitego braku naczyń krwionośnych (C). W Tlx. /. myszy, naczynia krwionośne nigdy nie wyrastają z łodygi naczyń hialoidalnych na głowie nerwu wzrokowego (groty strzałek w D). Barwienie jądrowe przez jodek TO-PRO-3 pojawia się na niebiesko. Powiększenie, × 70 (A), × 400 (B), × 100 (C), × 280 (D). Chociaż sieć astrocytów rozwinęła się w siatkówkach Tlx. /. myszy, aczkolwiek nienormalnie, naczynia krwionośne były całkowicie nieobecne (Figura 5C). Było to związane z niepowodzeniem w normalnej inicjacji angiogenezy siatkówki, ponieważ żadne naczynia nie wyrosły poza tarczę wzrokową (Figura 5D). Tak więc Tlx. /. w astrocytach brakowało również lub więcej istotnych właściwości proangiogennych. Co ciekawe, astrocyty siatkówki jednolicie wyrażają GFAP w Tlx. /. myszy, pomimo braku naczyń krwionośnych (Figura 5C), prawdopodobnie w wyniku części z utraty represji Tlx w transkrypcji GFAP. Tlx jest wymagany do tworzenia proangiogennego rusztowania poprzez kontrolę pozakomórkowego składania matryc fibronektyny w astrocytach siatkówki. Ponieważ głównym znanym wymogiem dla proangiogennych właściwości astrocytów siatkówki jest wydzielanie VEGF i formowanie macierzy pozakomórkowej, badaliśmy, czy upośledzenie któregokolwiek z tych właściwości może odpowiadać defektom angiogennym obserwowanym w siatkówkach Tlxa /. myszy. Całkowite poziomy mRNA VEGF utrzymywano w Tlx A / p. astrocyty (Figura 6A). Prawdopodobnie z powodu tej utrzymującej się ekspresji VEGF, naczynia hialoidowe nie uległy regresji iz upływem czasu powiększyły się i dały początek licznym pędom śródbłonkowym, które rosły w kierunku jajecznej siatkówki (Figura 6B). Rzeczywiście, kiełkowanie naczyń hialoidalnych było zależne od VEGF, ponieważ te naczynia krwionośne uległy regresji po wstrzyknięciu wewnątrzocznym pułapki VEGF (Figura 6B). Co ciekawe, w Tlx. /. myszy, nowe naczynia pochodzące od hialoidu były często obserwowane w celu nakierowania na obszary siatkówki o dużej powierzchni (Figura 6C), co sugeruje, że były one przyciągane przez VEGF wytwarzany przez te komórki. Jednakże, po dotarciu do siatkówki, te ektopowe naczynia rosły w pozornie losowy sposób, zamiast wykorzystywać istniejącą sieć astrocytów jako matrycę, jak to ma miejsce w normalnym rozwoju naczyń krwionośnych siatkówki (Figura 6D). Podsumowując, te odkrycia silnie sugerują, że brak inicjacji angiogenezy siatkówki w Tlx. /. Myszy nie są spowodowane brakiem VEGF per se, ale raczej cząsteczkami niezbędnymi dla pozakomórkowych macierzy szkieletów, które tworzą matrycę dla migracji śródbłonka i początkowego montażu pierwotnej sieci naczyń krwionośnych siatkówki. Figura 6Tx reguluje tworzenie proangiogennych rusztowań kontrolując pozakomórkowe odkładanie matryc fibronektyny w astrocytach siatkówki. (A i E) ISH całego montowania dla VEGF (A) lub fibronektyny (E) w siatkówkach P7 Tlx. /. myszy. Dolne panele są powiększeniami ISH (czarny) z immunobarakteryzowaniem dla PDGFR. (biały). W przeciwieństwie do zatrzymanej ekspresji VEGF w sieci astrocytów, fibronektyna ulega ekspresji tylko w małej części astrocytów w Tlx P / P. Siatkówka oka. OD, dysk optyczny. (B) Pełne immunostymulowanie dla PECAM-1 w P16 Tlxa /. miseczki siatkówki 48 godzin po iniekcji do gałki ocznej kontroli Fc (górne panele) lub VEGF Trap (dolne panele). Prawe panele to większe powiększenia naczyń hialoidalnych pokazane na lewym panelu. Trwałe naczynia hialoidalne i ich kiełki w Tlx. /. oczy cofają się poprzez neutralizację sygnałów VEGF. (C i D) Immunobarwienie PECAM-1 (zielony) i GFAP (czerwony) w siatkówce P14 Tlx. /. mysz. Ektopowe naczynia pochodzące od hyaloidów są skierowane na astrocyty siatkówki (C), ale nie są prowadzone przez wcześniej istniejące sieci astrocytów (D)
[hasła pokrewne: maseczka z siemienia lnianego na włosy, kalendarzyk miesiączkowy ob, crt p ]
[hasła pokrewne: jak radzić sobie ze stresem w szkole, nadpobudliwość psychoruchowa u dzieci, wrzodziejące zapalenie jelita grubego objawy ]