Skip to content

Stosowanie 3 ligandów TLR jako łączonego adiuwanta indukuje jakościowe zmiany w odpowiedziach komórek T potrzebne do ochrony antywirusowej u myszy ad

1 miesiąc ago

357 words

Nasze badanie ujawniło, że podczas gdy te podwójne kombinacje ligandów TLR ilościowo rozszerzają odpowiedzi limfocytów T, potrójna kombinacja wzmacnia jakościowo odpowiedzi poprzez wywoływanie komórek T o wyższej funkcjonalności, a tym samym skuteczniej chroni przed prowokacją wirusową. Wyniki MALP2, poli (I: C) i CpG ODN w potrójnej kombinacji wzmacniają odporność ochronną przed prowokacją wirusami. Wcześniej badaliśmy podwójne kombinacje dla MALP2, poli (I: C) (oznaczone jako PIC na rycinach) i CpG ODN i donoszono, że MALP2 + poli (I: C) i poli (I: C) + CpG, ale nie MALP2 + CpG może indukować synergiczną aktywację DC i odpowiedzi komórek T (5). Synergię badano w dawkach lub stężeniach, które okazały się nieoptymalne dla każdego z ligandów TLR, aby uzyskać wystarczające okno do wykrywania supra-addytywnych odpowiedzi. Stwierdzono, że mechanizm obejmuje jednokierunkową amplifikację przez receptor Toll / IL-1 (TIR) zawierający indukujący adaptację IFN (TRIF) szlaku sygnałowego zależnego od szlaku sygnałowego MyD88, co skutkuje zwiększoną produkcją IL-12, TNF-a, i IL-6, które są niezbędne do indukcji i wzmocnienia odpowiedzi komórek T. Odpowiedzi komórek T, szczególnie te z komórek T CD8 +, są niezbędne w zwalczaniu infekcji wirusowych. W tym miejscu zapytaliśmy, czy te ligandy w połączeniu działają jako skuteczne adiuwanty immunologiczne w celu wzmocnienia odporności komórek T CD8 + na infekcję wirusową. Hipotezę tę przetestowano na modelu immunizacji antygenem HIV z użyciem polipeptydu syntetycznego, PCLUS3-18IIIB, zawierającego peptyd epitopu HIV Env CD8 + CTL P18-I10 (przedstawiony przez H-2Dd) i peptyd epitopowy pomocnika CD4 zawierający skupisko zachodzących na siebie pomocników. epitopy (11). Peptydy zmieszano z ligandami TLR w metylosiarczku N- [1- (2,3-dioleoilo oksy) propylo] -N, N, N-trimetyloamoniowym (DOTAP) i podano myszom BALB / c wewnątrznaczyniowo (icr) z 3-tygodniem interwał między dawką pierwszą a zwiększoną, a myszy prowokowano rekombinowanym wirusem vP-16 (wykazującym ekspresję pełnej długości antygenu HIV) tą samą drogą 4 miesiące później (5, 12). Szczepienie z zastosowaniem kombinacji MALP2 i poli (I: C) (MALP2 + poli [I: C]) skutkowało ponad log redukcją miana wirusa w jajnikach w przeciwieństwie do szczepienia samym peptydem lub razem z pojedynczymi ligandami ( Figura 1A) (P <0,01). Szczepionki Poly (I: C) + CpG ODN wywoływały ograniczony, ale statystycznie istotny efekt antywirusowy w porównaniu z pojedynczymi ligandami, podczas gdy ODN MALP2 + CpG nie dawały prawie żadnej poprawy. Te wyniki sugerują, że pewne podwójne kombinacje działały jako adiuwanty w celu zwiększenia liczby limfocytów T, ale nie skutecznie tłumiły replikację wirusa. Jednakże, po immunizacji wszystkimi 3 ligandami TLR, mianowicie MALP2 + poli (I: C) + CpG ODN, myszy stłumiły replikację wirusa o więcej niż 3 log. Zatem potrójna kombinacja indukuje bardziej skuteczną odporność ochronną niż jakiekolwiek podwójne kombinacje (P <0,001). Figura Ligandy TLR w potrójnej kombinacji w szczepionce peptydowej mogą znacznie zmniejszać miano wirusa po prowokacji wirusami. (A) Myszy BALB / c stymulowano i wydłużono o 3 tygodnie za pomocą szczepionki przeciw peptydowi HIV Env razem z MALP2 + poli (I: C) + CpG na drodze icr (patrz szczegóły w Metodach). Cztery miesiące później, immunizowane zwierzęta poddano prowokacji icr vPE16, i po 6 dniach, parowane jajniki odzyskano dla miareczkowania wirusa za pomocą testu tworzenia łysinek. Pokazano jedno z 2 niezależnych eksperymentów o podobnych wynikach. Gwiazdka wskazuje różnicę między grupami (* P <0,05; ** P <0,01; *** P <0,001; n = 5). Grupa kombinacji ligandów TLR znacznie różni się od wszystkich innych grup. (B) Indukcja komórek T specyficznych wobec antygenu (tetramer +) w drenujących poplitalnych LNs po immunizacji sc w poduszce na stopy przy użyciu ligandów PCLUS3-18IIIB i TLR. Komórki LN odzyskano po 5 dniach i zliczono przez barwienie tetrameru i wewnątrzkomórkowego IFN-y. Wyniki reprezentują z 2 niezależnych eksperymentów. tet, tetramer. Wyniki przedstawiono jako średnie. SEM. Potrójna kombinacja ligandów TLR zwiększa wysokowydajne limfocyty T zachorowalności. Wzmocniona odporność ochronna wywołana przez potrójną kombinację MALP2 + poli (I: C) + CpG ODN i MALP2 + poli (I: C) była intrygująca i zaskakująca, ponieważ wcześniej wykazaliśmy, że CpG nie wykazuje synergii z MALP2 (5). Początkowo sądziliśmy, że wzmocnienie może być spowodowane znacznym wzrostem częstości komórek T CD8 + swoistych wobec antygenu i w ten sposób badać komórki T CD8 + specyficzne dla P18-I10 . po immunizacji w poduszce na stopy poprzez wstrzyknięcie sc peptydu PCLUS3-18IIIB i TLR. ligandy. Pomimo lepszej ochrony, liczba limfocytów T CD8 + pozytywnych względem tetrameru P18-I10 w drenujących poplitalnych LN w 5 dni indukowanych przez potrójną kombinację nie była synergistycznie zwiększona w porównaniu do podwójnie synergistycznych kombinacji (Figura 1B). [przypisy: leki na wątrobę bez recepty, kalendarzyk miesiączkowy ob, polskie towarzystwo ginekologiczne ] [hasła pokrewne: jak radzić sobie ze stresem w szkole, nadpobudliwość psychoruchowa u dzieci, wrzodziejące zapalenie jelita grubego objawy ]