Skip to content

Rola różnych szlaków kaskady dopełniacza w eksperymentalnym pemfigoidzie pęcherzykowym ad 5

2 miesiące ago

412 words

Dokładnie to znaleźliśmy w następnym zestawie eksperymentów: C4. /. myszom (n = 6) wstrzyknięto lokalnie związek 48/80, silny środek do degranulowania MC, a następnie patogenne blistry kliniczne anty-mBP180 IgG w takim samym stopniu jak myszy WT, którym wstrzyknięto IgG (tabela 1). Podobnie jak chore myszy WT (figura 6A), rozległa degranulacja MC miała miejsce w skórze właściwej związku 48 C4 A / 48 traktowanego 48/803 myszy (Figura 6C). W przeciwieństwie do C4. /. myszy bez związku 48/80 nie wykazywały żadnych zmian skórnych i minimalnej degranulacji MC (Figura 6B). WT lub C4. /. myszy, którym wstrzyknięto sam związek 48/80 jako kontrolę, wykazywały degranulację MC, ale bez zmian skórnych (Tabela 1). Testy ilościowe ujawniły również znacząco podwyższony poziom degranulacji MC (Figura 6D) i infiltrację PMN (Figura 6E) w związku C4 (4/48 traktowanym 48/80 p myszy w stosunku do C4a /. myszy bez związku 48/80 przed traktowaniem. Wyniki te dalej wykazują, że aktywacja dopełniacza działa przed degranulacją MC w kaskadzie zapalnej wywołanej anty-mBP180 IgG. Figura 6 Wpływ środka degranulującego MC na infiltrację PMN i pęcherze podnabłonkowe w patogennym C4 (3 z wstrzykniętym IgGc. myszy. WT i C4. /. myszom wstrzyknięto patogenne IgG anty-mBP180 R530 (2,6 mg / g masy ciała) z lub bez wstępnego potraktowania związku 48/80 (C48 / 80) środka do degranulowania MC i zbadano 2 godziny (dla zabarwienia błękitem toluidynowym) i 12 godzin (do badania klinicznego i testu MPO) po wstrzyknięciu IgG. (A. C) Badanie kliniczne i zabarwienie błękitu toluidynowego na skórze myszy wykazały pęcherze podnaskórkowe i degranulację MC w WT (A) i C4 (3 /. myszy ze wstępną obróbką 48/80 (C). (B) W przeciwieństwie do C4. /. myszy bez związku 48/80 nie wykazywały żadnych zmian skórnych i minimalnej degranulacji MC. (D) MC w skórze właściwej zliczano i klasyfikowano jako degranulowane lub normalne. Obliczono całkowitą liczbę MC w 5 losowych polach (średnia, 31,72 . 8, l1) i obliczono procent degranulacji MC. Zgodnie z oczekiwaniem, degranulacja MC była znacznie zmniejszona w C4 (3 /. myszy w porównaniu z myszami WT. Jednakże zaobserwowano znaczący wzrost degranulacji MC w skórze złożonej z 48/80 cc traktowanych C4 (3). myszy. n = 6 na grupę. (E) Test aktywności MPO ujawnił znacznie wyższe poziomy infiltracji PMN w WT i C4 (3 /. myszy ze wstępnym traktowaniem 48/80 niż te bez niego. Aktywność MPO w tkankach w miejscu wstrzyknięcia wyrażono jako względną aktywność MPO. Przeprowadzono trzy niezależne eksperymenty na grupę. n = 6 na grupę. ** P <0,01 w stosunku do WT i poddanego wstępnej obróbce C4. /. myszy. Patogenne IgG anty-mBP180 wywołuje pęcherze podnaskórkowe w C4 (3 / l. myszy odtworzone z PMN myszy lub przez wstrzyknięcie id chemotaktycznego czynnika PMN IL-8 Nasze odkrycia wskazują, że główną funkcją aktywacji dopełniacza w doświadczalnym BP jest aktywacja MC. Ponieważ aktywowane MC degranulują, rekrutując PMN do miejsca skóry w eksperymentalnym BP, oczekuje się, że sztucznie rekrutują PMNs z krążenia do skóry właściwej C4a / r. myszy powinny obchodzić wymóg zarówno aktywacji układu dopełniacza, jak i degranulacji MC dla fenotypu choroby. C4. /. myszom wstrzyknięto patogenną IgG, a następnie odtworzono z użyciem PMN myszy. C4. /. myszy odtworzone za pomocą 5 x 105 PMN (n = 6) wytworzyły pęcherze pod skórą 12 godzin po wstrzyknięciu IgG (Figura 7 i Tabela 1). Ponadto C4. /. myszy (n = 6) po wstrzyknięciu id IL-8 przed lub w połączeniu z traktowaniem anty-mBP180 IgG rozwinęło obszerne blistry 12 godzin później (Figura 7 i Tabela 1). Istotnie wyższe poziomy infiltracji PMN zaobserwowano w skórze zmianowej C4 (3 /. myszy z rekonstytucją PMN w porównaniu z myszami C4 (3 / (3 bez rekonstytucji PMN (Figura 7). Średnie poziomy aktywności MPO w ekstraktach skórnych C4. /. myszy, którym wstrzyknięto IgG anty-mBP180 plus IL-8 i anty-mBP180 plus PMN miały 1,31. 0,29 i 1,43. 0,36 białka OD460 / mg, odpowiednio, w porównaniu z 0,47. 0,04 OD460 / mg białka w skórze od C4. /. myszy wstrzyknięto sam anty-mBP180 IgG (P <0,01). Podsumowując, wyniki te wyraźnie pokazują, że aktywacja dopełniacza za pośrednictwem szlaku klasycznego bierze udział głównie w rekrutacji PMN przez bezpośrednie aktywowanie MC w doświadczalnym BP. Figura 7 Rekonstrukcja PMN w tkankach in vivo przywraca eksperymentalne ciśnienie krwi w C4 (3 /. myszy. C4. /. myszom wstrzykiwano id z patogennym anty-mBP180 R530 IgG samym lub w połączeniu z IL-8 (50 ng / wstrzyknięcie) lub PMN (5 x 105 komórek) i badano 12 godzin po wstrzyknięciu IgG [więcej w: ciekawe miejsca w czechach, kardiolog blog, nadpobudliwość psychoruchowa u dzieci ] [więcej w: peeling kawitacyjny przeciwwskazania, leki na wątrobę bez recepty, wiarygodny test internetu ]