Skip to content

Przedoperacyjny test diagnostyczny odróżniający łagodny od złośliwego raka tarczycy na podstawie ekspresji genów ad 7

2 miesiące ago

722 words

Zdefiniowanie małego zestawu najlepszych przeciwciał predykcyjnych prawdopodobnie wymagałoby poprawy rozpoznania FNA. ważnym celem, ponieważ klinicyści obecnie używają FNA jako pierwszego przedoperacyjnego testu diagnostycznego. Około 10. 25% guzów jest klasyfikowanych jako nieokreślone lub podejrzane przez FNA, a większość pacjentów z tymi guzkami jest kierowana do operacji. Niepotrzebne usunięcie łagodnych guzów pęcherzykowych zwiększa długoterminowe koszty opieki zdrowotnej. Dodatkowo czułe markery wykrywające raka przez FNA mogą przyspieszyć wykrywanie i dalsze leczenie. W grupie pacjentów analizowanych w tym badaniu za pomocą immunohistochemii, doniesienia cytologiczne FNA ujawniły, że 36 z 59 guzów pęcherzykowych zostało zdiagnozowanych jako podejrzane . Całkowitym wycięciem tarczycy było leczenie z wyboru, a wynik ujemny został potwierdzony w stałej patologii w 20 przypadkach (66%, Tabela dodatkowa 2). Test immunohistochemiczny wykorzystujący dwa dostępne przeciwciała przeciwko dwóm genom DDIT3 i ARG2 o różnej ekspresji poprawnie zaklasyfikował 29 z 32 FTA (90,6%) i 23 z 27 FTC (85,2%) (Tabela 3). Jednak czułość i swoistość tego testu powinna być dalej oceniana poprzez analizę innych genów o różnej ekspresji, zaczynając od ITM1. Inne podtypy, takie jak guzy Hürthle, mogą wymagać oceny przez SAGE w celu wygenerowania markerów specyficznych dla tej klasy molekularnej guza tarczycy. Ten prosty test, oparty na markerach nowotworowych, które opisujemy, może poprawić zarówno przedoperacyjną diagnozę guzków tarczycy przez FNA, jak i późniejsze leczenie, przy jednoczesnym obniżeniu kosztów. Konieczne będzie proste i opłacalne podejście, w szczególności w regionach świata, w których systemy opieki zdrowotnej są ograniczone finansowo. Chociaż ten niewielki zestaw danych wytworzył solidny model predykcji, a wysoka zgodność między wynikami patologii i immunohistochemii, większe rozmiary próbek i testowanie dodatkowych przeciwciał w celu znalezienia optymalnej kombinacji powinno poprawić ten model. Metody Próbki tkanek. Do analizy RT-PCR uzyskano 23 guzy pierwotne od pacjentów, u których zdiagnozowano najpierw guz pęcherzykowy tarczycy; guzy zamrożono natychmiast po biopsji chirurgicznej. Wszystkie próbki zostały pobrane od pacjentów w Szpitalu S.o Paulo, Federalnym Uniwersytecie w Sao Paulo oraz w szpitalu Heliópolis (S.o Paulo, Brazylia). Badanie zostało zatwierdzone przez komisje ds. Etyki i badań Uniwersytetu Federalnego S.o Paulo i szpitala Heliópolis i było zgodne ze Światowymi Stowarzyszeniami Medycznymi. 1975 Deklaracja Helsińska, zmieniona w 1983 r. Od każdego pacjenta otrzymano podpisany list świadomej zgody. Histologia tkanek potwierdziła wstępne rozpoznanie, jak podsumowano w Tabeli 1. Próbki zawierały 10 umów o wolnym handlu i 13 FTC. Ponadto przeanalizowaliśmy osiem dopasowanych do pacjenta prawidłowych tkanek uzyskanych od pacjentów z FTC (n = 5) i FTA (n = 3). Jako kontrolę zastosowano Total Universal Human Reference RNA (Stratagene, La Jolla, Kalifornia, USA). W badaniu immunohistochemicznym uzyskaliśmy materiały patologiczne z próbek zdiagnozowanych z FTC (n = 27) i FTA (n = 32) w szpitalu S.o Paulo, Federalnym Uniwersytecie S.o Paulo, w okresie 8 lat od 1996 r. Do 2003. Sekcje barwione H & E zostały poddane przeglądowi przez doświadczonego patologa. Linie komórkowe. Ludzką linię komórkową FTC UCLA RO-82W-1, brodawkowatą linię raka tarczycy UCLA NPA-87-1 i niezróżnicowaną linię komórek raka tarczycy, UCLA RO-81A-1, hodowano w DMEM (Invitrogen Corp., Carlsbad, Kalifornia, USA) z dodatkiem 10% FCS (Invitrogen Corp.) w środowisku 5% CO2 w 37 ° C, jak opisano wcześniej (20). Biblioteki SAGE. Jedna FTA, jedna FTC i jedna normalna tarczycy zostały wybrane dla SAGE (17). Biblioteki skonstruowano przy użyciu procedury microSAGE (50) i sekwencjonowano przez część SAGE Cancer Genome Anatomy Project (51). Znaczniki zostały wyodrębnione ze zautomatyzowanych plików tekstowych sekwencji; oraz duplikaty ditagów, sekwencji łączników i powtarzalnych znaczników zostały usunięte przy użyciu oprogramowania SAGE 2000 w wersji 4.12 (dostępnego pod adresem http://www.sagenet.org). Funkcja symulacji Monte Carlo tego programu została wykorzystana do określenia wartości P genów o różnej ekspresji. Pełny zestaw znaczników dla wszystkich trzech bibliotek jest dostępny do pobrania lub analizy w witrynie Cancer Genome Anatomy Project SAGE Genie pod adresem http://cgap.nci.nih.gov/SAGE (52). Izolacja RNA, synteza cDNA i ilościowy RT-PCR. Aby zweryfikować profil różnicowy genu przewidywany przez SAGE, przetestowaliśmy 17 genów z najwyższą indukcją fałdowania i przeanalizowaliśmy je za pomocą ilościowej RT-PCR w czasie rzeczywistym. Całkowity RNA wyizolowano przy użyciu RNAgents (Promega Corp., Madison, Wisconsin, USA), zgodnie z zaleceniem producenta
[przypisy: jak radzić sobie ze stresem w szkole, nadpobudliwość psychoruchowa u dzieci, outlet szczecin godziny otwarcia ]
[przypisy: crt d, crt kardiologia, badanie elektrofizjologiczne serca ]