Skip to content

Neurony dopaminergiczne wytwarzane z funkcji embrionalnych komórek macierzystych małpy w modelu naczelnych Parkinsona

2 miesiące ago

716 words

Choroba Parkinsona (PD) jest chorobą neurodegeneracyjną charakteryzującą się utratą neuronów dopaminergicznych (DA) śródmózgowia. Komórki ES są obecnie najbardziej obiecującym źródłem komórek zastępczych w PD. Wcześniej opisywaliśmy silną aktywność neurologiczną obecną na powierzchni komórek podścieliska, określaną jako aktywność indukująca pochodną komórek zrębowych (SDIA). W tym badaniu wygenerowaliśmy neurosfery złożone z neuronalnych progenitorów z małpich komórek ES, które są zdolne do wytwarzania dużej liczby neuronów DA. Wykazaliśmy, że FGF20, preferencyjnie wyrażany w istocie czarnej, działa synergistycznie z FGF2 w celu zwiększenia liczby neuronów DA w neurosomach pochodzących z komórek ES. Przeanalizowaliśmy również wpływ transplantacji neuronów DA generowanych z małpich komórek ES na potraktowane 1-metylo-4-fenylo-1,2,3,6-tetrahydropirydyną (potraktowane MPTP) małpy, model prymasowy dla PD. Badania behawioralne i obrazowanie czynnościowe ujawniły, że przeszczepione komórki funkcjonowały jako neurony DA i osłabiały indukowane przez MPTP objawy neurologiczne. Wprowadzenie Choroba Parkinsona (PD) jest zaburzeniem neurodegeneracyjnym charakteryzującym się utratą neuronów dopaminergicznych (DA) śródmózgowia, a następnie obniżeniem poziomu dopaminy w prążkowiu. Podczas gdy początkowe leczenie farmakologiczne L-dihydroksyfenyloalaninem (L-DOPA) może złagodzić objawy, skuteczność tego leczenia stopniowo zmniejsza się z czasem. Rozwój powikłań ruchowych wymaga następnie dodatkowych terapii, w tym głębokiej stymulacji mózgu i transplantacji neuronów DA płodu (1. 3). Oba badania modeli zwierzęcych i badań klinicznych wykazały, że transplantacja płodowych neuronów DA może powodować złagodzenie objawów (4. 8). Techniczne i etyczne trudności w uzyskaniu wystarczającej i odpowiedniej tkanki mózgowej płodu dawcy ograniczyły zastosowanie tej terapii. Komórki ES są samoodnawiającymi się, pluripotencjalnymi komórkami pochodzącymi z wewnętrznej masy komórek blastocysty przedimplantacyjnego. Komórki te mają wiele cech wymaganych od źródła komórek do terapii zastępowania komórek, w tym zdolności proliferacji i różnicowania (9). Wcześniej odkryliśmy, że na powierzchni komórek zrębowych obecna jest silna aktywność neurologiczna, którą nazwaliśmy indukowaniem komórek zrębowych (SDIA). W przypadku braku egzogennego morfogennego białka a4, mysie komórki ES różnicują się skutecznie w prekursorach nerwowych i neuronach, gdy są hodowane przez tydzień na mysich komórkach zrębu wyrażających SDIA (komórki PA6) (10). Niedawno indukowano SDIA w stosunku do komórek ES naczelnych, które wytworzyły dużą liczbę prekursorów neuronowych i neuronów pomitotycznych, gdy hodowano je na komórkach PA6 przez dwa tygodnie (11). Metoda SDIA jest zarówno prosta technicznie, jak i wydajna, wytwarzając znaczną liczbę neuronów DA śródmózgowia (10, 11). Samoregenerujące się, multipotencjalne komórki progenitorowe mogą być hodowane jako neurosfery (12). W tym badaniu wygenerowaliśmy neuronowe komórki progenitorowe z małpich komórek ES, następnie rozszerzyliśmy je jako neurosfery, które zawierały progenitory neuronów DA. Ponadto przeanalizowaliśmy wpływ FGF20, nowego członka rodziny czynników wzrostu FGF, który jest wyrażany wyłącznie w istocie czarnej mózgu i który ma działać ochronnie na neurony DA (13). Zaobserwowaliśmy zwiększoną indukcję neuronów DA po leczeniu FGF20. Ponadto przeszczepiliśmy neurony generowane tą metodą do potraktowanych małpami cynomolgus traktowanymi 1-metylo-4-fenylo-1,2,3,6-tetrahydropirydyną (traktowanymi MPTP), modelem naczelnych PD. Stwierdziliśmy, że przeszczepione komórki mogą funkcjonować jako neurony DA i mogą zmniejszać objawy parkinsonizmu. Jest to pierwsze sprawozdanie, zgodnie z naszą wiedzą, demonstrujące skuteczność terapii transplantacyjnej przy użyciu neuronów DA pochodzących z komórek ES w eksperymentalnym modelu prymasowym PD. Wyniki Indukcja neuronalnych komórek progenitorowych z małpich komórek ES. Aby wzbogacić przeszczepialne komórki progenitorowe neuronowe, najpierw hodowaliśmy małpie komórki ES na zwojach komórek podścieliska PA6, a następnie odłączaliśmy komórki od karmników w celu ich ekspansji jako neurosfer. Komórki ES zaczęły różnicować się na komórkach PA6, z komórkami immunoreaktywnymi dla neuronowych markerów progenitorowych, takich jak cząsteczka adhezyjna komórek N (NCAM) i Musashi-1 (11, 14), pojawiające się w ciągu trzech dni. Komórki ES proliferowały i różnicowały się na warstwie odżywczej przez tworzenie kolonii, a komórki dodatnie dla markerów neuronowych zwiększały liczbę aż do 2 tygodni w okresie hodowli. Procenty kolonii obejmujące co najmniej NCAM- lub Musashi-1 (3-pozytywną komórkę osiągnęły około 100% po 2 tygodniach hodowli (NCAM = 90,4%. 7,5%, Musashi-1 = 97,5%. 4,6%, n = 100 z 3 niezależne kultury, rysunek 1A)
[przypisy: psychoterapia na czym polega, wiarygodny test internetu, polskie towarzystwo ginekologiczne ]
[przypisy: nakładanie żelu na paznokcie, ciasta bezglutenowe przepisy, peeling kawitacyjny przeciwwskazania ]