Skip to content

Neurony dopaminergiczne wytwarzane z funkcji embrionalnych komórek macierzystych małpy w modelu naczelnych Parkinsona ad 5

2 miesiące ago

730 words

Chociaż FGF2 i EGF sprzyjają proliferacji komórek prekursorowych komórek nerwowych, to pierwszy promuje różnicowanie neuronów, podczas gdy drugi indukuje różnicowanie glejowe (12, 25, 26). Mają również różny wpływ na różnicowanie ciał embrioidalnych pochodzących z ludzkich komórek ES (27). W niniejszym badaniu z zastosowaniem prekursorów neuronalnych pochodzących od naczelnych komórek ES, FGF2 zwiększyło różnicowanie komórek ES do neuronów DA, podczas gdy EGF hamowało ten proces nawet w obecności FGF2 i FGF20. Możliwe, że EGF koliduje z różnicowaniem sfer leczonych SDIA w neurony DA bezpośrednio lub pośrednio przez promowanie indukcji astroglejowej. Alternatywnie, EGF może stymulować proliferację lub różnicowanie innej populacji komórek niż ta stymulowana przez FGF2. Różnorodne efekty czynników wzrostu stanowią intrygujący temat do przyszłych badań. W badaniach naczelnych funkcjonalne neuroobrazowanie jest użytecznym narzędziem do oceny in vivo różnicowania, przeżycia i integracji funkcjonalnej przeszczepionych komórek. Obrazowanie PET presynaptycznych odczynników ukierunkowujących, takich jak fluoro-dopa, fluoro-metatyrozyna lub 2-karbo-metoksy-3a-4-fluorofenylo-tran (CFT), określa, czy komórki wszczepiane in vivo mają mechanizmy molekularne niezbędne do syntezy i / lub przechowywania dopaminy ( 28-30). W tym badaniu zbadaliśmy wychwyt fluoro-dopa w 14 tygodniu po transplantacji. Znaczący wzrost średniej wartości Ki w skorupie przeszczepionych komórek ES spowodował, że przeszczepione komórki funkcjonowały jako neurony DA. Badanie pośmiertne małp z przeszczepionymi komórkami ES na Figurze 4C ujawniło, że więcej komórek T-dodatnich przeżyło w obrębie właściwej skorupy. To odkrycie odzwierciedla korelację wyników PET z przeżyciem neuronów DA. W przypadku przyszłych badań szczegółowe analizy z zastosowaniem dodatkowych znaczników, w tym markerów postsynaptycznych, takich jak fluoro-rakloprid, powinny umożliwić dalsze zrozumienie funkcjonalnych aspektów szczepionych komórek. W tym badaniu wykryliśmy znaczące różnice w średnich wartościach Ki z całej skorupy między małpami po przeszczepie komórek ES i małpami kontrolnymi poddanymi procedurze pozorowanej 3 miesiące po operacji. Widner i in. (8) donoszą, że wychwyt śluzu przez fluoro-dopę nie zmienił się od 5 do 6 miesięcy po operacji, ale znacznie wzrósł w 12 do 13 i 22 do 24 miesięcy u pacjentów, którzy otrzymali przeszczepy śródmózgowe płodu. Freed i wsp. (4) podali poprawioną wartość Ki z całej skorupy po 6 miesiącach po przeszczepie. Biorąc pod uwagę dłuższe okresy monitorowania w tych sprawozdaniach, nasza ocena średnich wartości Ki po 3 miesiącach może nadal być przedwczesna; dalsze badania PET w późniejszych punktach czasowych mogą skutkować jeszcze większymi zmianami. MPTP jest neurotoksyną, która powoduje wybiórcze niszczenie neuronów DA w istocie czarnej pars compacta, indukując objawy podobne do PD u naczelnych (31, 32). Po powtarzanych dożylnych wstrzyknięciach MPTP (w sumie około 17 mg na zwierzę) małpy stabilnie wykazywały objawy podobne do PD ponad 12 tygodni przed operacją przeszczepu. Przy ślepej ocenie opartej na wynikach neurologicznych wykryliśmy znaczącą poprawę behawioralną małp z przeszczepionymi komórkami ES 10 tygodni po transplantacji. Niedawno, w dwóch podwójnie ślepych próbach klinicznych kontrolowanych placebo z przeszczepem nelfowym płodu (4, 7) wykazano, że u młodszych pacjentów i pacjentów z łagodnymi objawami poprawa nastąpiła po leczeniu, a po raz pierwszy zaobserwowano poprawę zachowania po 3 do 4 miesięcy po operacji. W badaniu tym postawą i ruchliwością były objawy wskazujące na najbardziej znaczącą poprawę. Wyniki te są porównywalne z raportami klinicznymi (4, 33), wykazującymi poprawę sztywności i hipokinezy. Badania PET i immunofluorescencji wykazały, że znaczna liczba przeszczepionych komórek przetrwała w skorupie do funkcjonowania jako neurony DA. Przeszczepiliśmy 300 000. 600 000 komórek z każdej strony mózgu każdej małpce. Liczba komórek, które przeżyły, wykrytych przez barwienie BrdU wynosiła w przybliżeniu 8 000 na stronę. Zatem przeżywalność przeszczepionych komórek wynosiła 1,3% do 2,7%, chociaż rzeczywista wartość mogła być wyższa (omówiona poniżej). Poprzez barwienie TH wykazano, że liczba przeżywających neuronów DA wynosi w przybliżeniu 4 300 na mózg. W normalnych mózgach w prążkowiu nie ma ciał komórek neuronowych DA, a jedynie włókna. Tak więc, te komórki TH-dodatnie uważano za pochodzące z przeszczepionych komórek ES. Podczas gdy przeszczepione komórki były znakowane BrdU przed przeszczepieniem, tylko 65% tych komórek z pozytywnym wynikiem testu TH było immunoreaktywnych dla BrdU. Mogło to wynikać z niepełnego oznakowania komórek wejściowych; ponieważ komórki traktowano BrdU podczas hodowli w postaci kulek, szybkość znakowania nie wynosiła 100%, ale 68,8%
[więcej w: ciasta bezglutenowe przepisy, crt d, nakładanie żelu na paznokcie ]
[przypisy: badanie elektrofizjologiczne serca, kardiolog blog, badania elektrofizjologiczne ]