Skip to content

Komórki Th22 reprezentują odrębny ludzki podzbiór komórek T związany z odpornością na naskórek i przebudową ad

1 miesiąc ago

44 words

Limfocyty T permeabilizowano, a ich profil cytokin badano za pomocą cytometrii przepływowej i wielokolorowego barwienia wewnątrzkomórkowego. Zgodnie z oczekiwaniami zaobserwowano oczywiste różnice między próbkami. Komórki T pochodzące od AE charakteryzowały się dużym udziałem limfocytów T eksprymujących IL-4 (30,5% <10,0%), podczas gdy komórki T pochodzące z PS i ACD wykazywały przewagę ekspresyjnych komórek T IFN-a (PS, 34,3%. 3,7%, ACD, 36,4%. 4,8%, Figura 1F i dodatkowa Tabela 1, materiał uzupełniający dostępny online z tym artykułem; doi: 10,1172 / JCI40202DS1). Populacja wyrażająca IL-17a była największa w PS (17,4%. 4,2%), a następnie ACD (13,1%. 3,1%) i AE (9,0%. 1,2%, Figura 1). Ta populacja wykazująca ekspresję IL-173 nakładała się na komórki T wytwarzające IFN – y oraz, w mniejszym stopniu, na komórki wyrażające IL-4, podczas gdy około 50% stanowiły czyste komórki Th17 (zarówno IL-4, jak i IFN-y-ujemne). Komórki T wytwarzające IL-223 obserwowano zarówno w PBMC, jak i zapalnych chorobach skóry. Chociaż różnice między osobnikami były wysokie, częstotliwość komórek T IL-22 + była istotnie wyższa w liniach komórek T pochodzących z skóry niż w krążeniu (PBMC, 2,3%, 0,4%, PS, 15,9%, 2,3%, AE, 13,8%). <4,0%, ACD, 12,9%> 2,4%, Figura 1E). W ten sposób komórki IL-22 + zostały wzbogacone w stan zapalny skóry. Figura 1Te22 komórki stanowią odrębny podzbiór komórek T wzbogacony w zapalne choroby skóry. (A (D) Reprezentatywne 4-kolorowe wewnątrzkomórkowe barwienie cytokin pierwotnych ludzkich limfocytów T pochodzących z PBMC (A), PS (B), AE (C) i ACD (D) dla IL-22, IL-17, IFN- a, i IL-4. Pokazano wykresy punktowe dla IL-22 i IL-17 oraz komórek bramkowanych IL-17a IL-22 + (czerwony zarys) dla IFN-y i IL-4. Komórki Th22 są pokazane czerwonym cieniowaniem. Liczby wskazują względne procenty na ćwiartkę. (E) Częstotliwość komórek IL-22 + w PBMC (n = 4) i PS (n = 3), AE (n = 4) i ACD (n = 3). Symbole oznaczają poszczególne oznaczenia, a poziome słupki oznaczają średnią. * P <0,05; ** P <0,01. (F) Plastyczność w fenotypach komórek T, jak pokazano przez koekspresję IL-22 z innymi cytokinami w PS (n = 3), AE (n = 4) i ACD (n = 4). Szare owale oznaczają skalę, co wskazuje 1% wszystkich komórek. (G) Większość komórek T IL-22 + należy do subpopulacji CD4 +, jak pokazano dla komórek posortowanych CD4 / CD8 z PBMC i linii komórek T skóry PS, AE i ACD. Liczby wskazują względne procenty na ćwiartkę. Oprócz odrębnych populacji IL-4, IFN-y i IL-17, podzbiór limfocytów T wydzielających samą IL-22 był obecny jako silna pojedyncza jednostka dodatnia. W zależności od choroby, około jedna trzecia wszystkich komórek IL-22 + stanowiły jasne komórki Th22 (Suplementowa Figura 1), a kolejna trzecia była komórkami Th17 kopiującymi IL-22; w ten sposób komórki Th22 i Th17 były głównymi źródłami limfocytów T IL-22. Nakładanie się ekspresji cytokin obserwowane w komórkach T pochodzących od zapalnych chorób skóry pokazano na Figurze 1F. Dane te pokazują, że rozmiar i prawdopodobna plastyczność z podzbiorów Th1, Th2, Th17 i Th22 w stosunku do sąsiednich fenotypów była różna dla różnych chorób. Ponieważ IL-22 nie jest uwalniana wyłącznie przez limfocyty T, badaliśmy komórki IL-22 + z krwi i skóry pod kątem ich ekspresji markerów komórek T. Większość komórek IL-22 + znaleziono w obrębie subpopulacji CD4 + w krążących PBMC i AE, podczas gdy zarówno w PS, jak i ACD, niewielką, ale istotną frakcją była IL-22 + CD4. (Figura 1G). Nasze dane podkreślają, że komórki Th4 CD4 + stanowią główne źródło IL-22 w skórze, chociaż IL-22 była również wydzielana przez inne podzbiory leukocytów, takie jak komórki NK i komórki T CD8 + (dane nie przedstawione). Charakterystyka klonów Th22. Podzbiory komórek T są określone przez epigenetycznie odciśnięty profil cytokin, który zakłada się, że jest stabilny w stosunku do wielu podziałów komórkowych, umożliwiając w ten sposób amplifikację odpowiedzi immunologicznych przez klonalną ekspansję. Zaczynając od linii komórek T, jak analizowano na Figurze 1, wygenerowaliśmy 244 odrębne klony komórek T od 2 dawców z AE (143 klony), 44 klony od pacjenta z ACD i 57 klonów od pacjenta z PS (Tabela 1). Tabela Charakterystyka klonów komórek T pochodzących z skóry Zgodnie z analizą pojedynczych komórek z biopsji, wiele klonów Th22 scharakteryzowano przez samotną ekspresję IL-22, która nie wykazywała istotnego wydzielania białka IL-4, IFN-y lub IL. -17 (Figura 2, A. C, lewa). Jak zaobserwowano dla znacznej większości klonów komórek T wyizolowanych ze skóry, komórki Th22 były zdolne do wydzielania IL-10 i / lub TNF-a. Wzorzec wydzielania cytokin izolowanych klonów Th22 był wyjątkowo stabilny nawet po 4 ponownej stymulacji w kolejnych 10-tygodniowych hodowlach. Klony Th22 uwalniały IL-22 w ciągu 6 godzin, osiągając szczyt po 12 godzinach i utrzymujące się na tym poziomie przez co najmniej 48 godzin (Figura 2, A. C, po prawej) [więcej w: wrzodziejące zapalenie jelita grubego objawy, leki na wątrobę bez recepty, polskie towarzystwo ginekologiczne ] [hasła pokrewne: crt d, crt kardiologia, badanie elektrofizjologiczne serca ]