Skip to content

Komórki Th22 reprezentują odrębny ludzki podzbiór komórek T związany z odpornością na naskórek i przebudową ad 7

1 miesiąc ago

729 words

Jednak profil transkryptomu ujawnił również charakterystykę keratynocytów, które, jak uważamy, wcześniej nie były znane, w tym zdolność do przyczyniania się do ekspresji czynników dopełniacza, takich jak C1s, C1r i CFB oraz ekspresja TLR3 i TLR6, oprócz opisanej powyżej zdolności keratynocytów do ekspresji genów S100 i defensyn w odpowiedzi na IL-22 (14). Komórki Th22 mają również potencjał do promowania odporności adaptacyjnej i odporności wrodzonej dzięki indukcji w komórkach keratynocytu indukcji czynników stymulujących komórki T i NK, takich jak IL-15 i IL-7. Szczególnie interesująca jest ekspresja IL-32 cytokiny wzmacniającej TNF-a przez keratynocyty, co odpowiada zdolności komórek Th22 do ekspresji TNF-a. Postawiliśmy hipotezę, że IL-22 i TNF-a reprezentują kluczową kombinację cytokin eksprymowanych przez komórki Th22, które odblokowują aktywację keratynocytów, jak kultury in vitro, stosując albo supernatanty Th22 albo kombinację IL-22 i TNF-a. maksymalnie indukował sygnaturę Th22 w keratynocytach, podczas gdy anty-IL-22 nie blokowała w pełni. a sama rekombinowana IL-22 nie była wystarczająca do indukcji. ekspresja tych genów. Ten podwójny klucz jest powtarzającym się schematem obserwowanym w regulacji limfoidalnej komórek tkanki w kontekście zapalnym, takim jak regulacja komórek nabłonkowych przez IL-17, która jest tylko maksymalna w synergii z IFN-a, IL-1 lub TNF-a. (42, 43). W przeciwieństwie do głównych wpływów na wrodzoną odpowiedź immunologiczną przez keratynocyty w kontekście prozapalnym, IL-22 i TNF-a. nie wykazywały synergizmu w ulepszonym gojeniu ran wyraźnie wywołanym przez komórki Th22. Efekt ten był jedynie zależny od IL-22 i odzwierciedlał indukcję genów promigracyjnych w keratynocytach przez IL-22 (8, 14, 44, 45). Dane te wskazują na podwójną funkcję IL-22 w odporności na skórę: z jednej strony, są ochronne i regeneracyjne, az drugiej strony, wzmacniają sygnały indukowane przez TNF-a, aby przyczynić się do prozapalnego mikrośrodowiska podczas reakcji odpornościowych skóry. Podsumowując, nasze obecne wyniki pokazują, że komórki Th22 reprezentują podzestaw komórek T wyjątkowo zdolny do regulowania odpowiedzi naskórka w zapalnych chorobach skóry. Podzbiór ten jest definiowany nie tylko przez stabilny i wyraźny profil ekspresji, ale również charakteryzuje się tym, co uważamy za nowy profil funkcjonalny. Identyfikacja komórek Th22 zapewnia cel komórkowy do interwencji terapeutycznej i może rzucić światło na dotychczas nieznane ścieżki w kontrolowaniu odporności tkanek i przebudowy. Metody Pacjenci. Dorośli pacjenci PS (n = 3) cierpieli na stabilną, umiarkowaną do ciężkiej blaszkę PS, określoną przez obszar PS i wskaźnik indeksu ciężkości (PASI) co najmniej 12, minimalne zaangażowanie przez PS 10% powierzchni ciała i historię PS co najmniej 6 miesięcy przed pobraniem próbki. Pacjenci z AE (n = 4) zostali zdiagnozowani zgodnie z kryteriami Hanifina i Rajki (46). Pacjenci z ACD (n = 4) wykazywali pozytywne testy płatkowe według kryteriów International Contact Dermatitis Research Group (47). Kryterium wykluczenia było miejscowe leczenie kortykosteroidami, fototerapia lub ogólnoustrojowe leczenie kortykosteroidami w ciągu 4 tygodni od pobrania próbki. Przed pobraniem próbek krwi lub skóry każdy uczestnik wyraził świadomą zgodę. Badanie zostało zatwierdzone przez komisję etyczną Istituto Dermopatico Dell. Immacolata. Izolacja i ekspansja limfocytów T i pierwotnych ludzkich keratynocytów. Klony komórek T pochodzące ze stanów zapalnych skóry wyizolowano zgodnie z wcześniejszym opisem (48). W skrócie, całe biopsje lub materiał z biopsji poddanych działaniu 0,5% dispazy (Roche) przez godzinę w 37 ° C w celu oddzielenia naskórka i skóry właściwej, hodowano w RPMI 1640 uzupełnionym 2 mM glutaminy, mM pirogronianu sodu, 1% nieistotne aminokwasy, 0,05 mM 2-merkaptoetanol, 1% penicylina / streptomycyna (wszystkie Invitrogen, RPMI complete) i 5% ludzka surowica (Sigma-Aldrich) uzupełniona 60 U / ml IL-2. Migrujące komórki zbierano po 2. 4 dniach i klonowano po 6 dniach przez ograniczone rozcieńczenie (0,6 komórek / studzienkę w 96-studzienkowych płytkach do mikromiareczkowania w kształcie litery U) w kompletnej 5% RPMI ludzkiej surowicy i 10% dezaktywowanej termicznie FBS (Hyclone) na warstwa podająca napromieniowanych PBMC, 30 IU / ml IL-2 i 1% PHA (Sigma-Aldrich). Świeżą pożywkę zawierającą IL-2 (Novartis) dodawano 3 razy w tygodniu, a klony ponownie stymulowano stosując napromienione PBMC dostarczające co 3 tygodnie. Alergen lub reaktywność haptenu obu linii komórek T i klonów określono przy użyciu testu włączania 3H-tymidyny. Zawartość cytokin w supernatantach klonów analizowano przy użyciu testu ELISA w celu identyfikacji tożsamości podzbioru Th (patrz tabela 1). Autologiczne keratynocyty izolowano przy użyciu poprzednio opisanej metody ssącej blistrze (43)
[podobne: ciasta bezglutenowe przepisy, wrzodziejące zapalenie jelita grubego objawy, przeciwwskazania do mikrodermabrazji ]
[więcej w: leki na wątrobę bez recepty, wiarygodny test internetu, jak radzić sobie ze stresem w szkole ]